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纯化小技巧 | “蓝胶”用得好,纯化没烦恼

2023年10月12日 09:16:18来源:百林科医药科技(上海)有限公司
  Blue 系列的层析介质通常也被大家亲切称为“蓝胶”,它是将Cibacron Blue共价连接到高度交联琼脂糖基架上而制成的亲和层析介质。
 
  蓝色染料Cibacron Blue可与多种蛋白质结合,如白蛋白、脂蛋白、干扰素、凝血因子;也可与多种酶结合,如激酶、脱氢酶和大多数需要含腺苷辅因子的酶(如NAD+)。
 
  Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)主要应用于白蛋白和干扰素的大规模纯化,酶的分离纯化,白蛋白的去除等方面。
 
  参数介绍 

*结合载量的测量条件:层析柱:4.7ml预装柱;平衡缓冲液:20 mM 柠檬酸, pH 5.5;洗脱缓冲液:50mM磷酸钠,2M氯化钠,pH 7;将过量的人血清白蛋白上样至层析柱,测量人血清白蛋白10%穿透时的动态结合载量(QB10)。

**层析介质在40℃,pH3-13 环境下放置7 天后,其理化性质和功能没有明显变化。
 ***v/v,体积比。
 
 性能表现--载量和回收率 
 
  采用人血清白蛋白作为样品,对Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)的DBC(动态结合载量)进行比较。

 

 
  实验条件如下: 
 
  层析柱:4.7 ml预装柱,装柱高度10 cm,柱体积约4.7 ml
 
  样品:人血清白蛋白(HSA), 1 mg/mL
 
  平衡缓冲液:20 mM 柠檬酸, pH 5.5
 
  洗脱缓冲液:50mM磷酸钠,2M氯化钠,pH 7
 
  流速:151 cm/h
 
  保留时间:5 min

图1结合洗脱图谱【以MaXtar Blue (HS)为例】

表1 Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)在QB10的动态结合力

 
  百林科可以提供包括Blue Chromstar FF,MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)在内的,不同基架、配基密度、结合载量的“蓝胶”,以期为更多用户的研发生产提供多样化选择。
 
  产品货号 

 

 
 

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